亚洲av人人澡人人爽人人夜夜,斗破苍穹年番在线观看免费,亚洲精品乱码久久久久久蜜桃不卡,日韩精品视频一区二区三区

MVE液氮罐細(xì)胞冷凍原理

時(shí)間:2019-07-02 10:42來(lái)源: 作者:ydgmve2020yyx 點(diǎn)擊:
實(shí)驗(yàn)原理 細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196~C液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用
實(shí)驗(yàn)原理

  細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196~C液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái),這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

  目前常用的保護(hù)劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。

  實(shí)驗(yàn)材料

  儀器:MVE液氮罐、凍存管(塑料螺口專(zhuān)用凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等

  試劑:0.25%胰酶、培養(yǎng)基、含保護(hù)劑的培養(yǎng)基(即凍存液)

  附:凍存液配制:培養(yǎng)基加入甘油或DSMO,使其終濃度達(dá)5-20%。保護(hù)劑的種類(lèi)和用量視不同細(xì)胞而不同。配好后4℃下保存。

  實(shí)驗(yàn)步驟

  1.消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液收集至離心管中。

  2.1000rpm離心10分鐘,棄上清液。

  3.沉淀加含保護(hù)液的培養(yǎng),計(jì)數(shù),調(diào)整至5×106/ml左右。

  4.將懸液分至凍存管中,每管1ml。

  5.將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口一定要嚴(yán),否則復(fù)蘇時(shí)易出現(xiàn)爆裂。

  6.貼上標(biāo)簽,寫(xiě)明細(xì)胞種類(lèi),凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細(xì)繩。

  7.按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時(shí))→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。

  注意:操作時(shí)應(yīng)小心,以免液氮凍傷。液氮定期檢查,隨時(shí)補(bǔ)充,絕對(duì)不能揮發(fā)干凈,一般30立升的液氮能用1~1.5月。MVE液氮罐
  • 本文鏈接地址:http://m.jg688.com/342.html
  • 收縮
    • 電話(huà)咨詢(xún)

    • 010-80204245
    • 微信咨詢(xún)
    无码成人性爽xo视频在线观看| 国产免费亂倫在线观看| 性夜影院爽黄a爽免费看不卡 | 好色先生tv| 美人被强行糟蹋np 各种play| 女朋友闺蜜奶好大下面好紧| 金瓶梅杨思敏| 玩弄japan白嫩少妇hd| 一女三黑人玩4p惨叫| 黄色电影网站| 五月天中文字幕mv在线| 欧美一区二区三区| 大肉蒂被嘬的好爽h公主| 5g影院天天5g天天爽| 特级毛片a片久久久久久| 精品无人国产偷自产在线| 卧铺车上把她做高潮了| 白女人荫蒂高潮视频| 被黑人扒开双腿猛进| 国产精品毛片av久久66| 久久性爱视频| 亚洲色欲色欲www在线成人网| 99精品亚洲av无码国产另类| 丰满人妻熟妇乱偷人无码| 国产成人a人亚洲精v品无码| GOGOGO免费视频观看| 浓精揉捏奶h女友| 护士表妺好紧竟然流水视频| 东北老妇爽大叫受不了| 全黄h全肉禁乱公| 欧洲aaaaa特级毛片| 各种各色bb小便| 欧美激情在线播放| free性玩弄少妇hd| 99精产国品一二三产区| 办公室玩弄娇喘秘书在线观看| 吃了他达拉非太硬还需要继续吃吗| 欧美性生交xxxxx久久久| 高清视频在线观看| 被老师摸着jj勃起有14厘米| 口述他进我身体全过程|