亚洲av人人澡人人爽人人夜夜,斗破苍穹年番在线观看免费,亚洲精品乱码久久久久久蜜桃不卡,日韩精品视频一区二区三区

將細(xì)胞保存在低溫-196℃液氮中的方法

時(shí)間:2019-10-10 09:16來源: 作者:ydgmve2020yyx 點(diǎn)擊:
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一,使用凍存技能將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時(shí)離開生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來,如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的重要要領(lǐng)之一,使用凍存技能將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫生存,可以使細(xì)胞臨時(shí)離開生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性生存起來,如許在必要的時(shí)間再蘇醒細(xì)胞用于實(shí)行。并且適度地生存肯定量的細(xì)胞,可以防備因正在造就的細(xì)胞被污染或其他不測(cè)變亂而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。查特液氮罐

除此之外,還可以使用細(xì)胞凍存的情勢(shì)來購(gòu)置、寄贈(zèng)、互換和運(yùn)送某些細(xì)胞。 細(xì)胞凍存時(shí)向造就基中參加掩護(hù)劑——終濃度5%~15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)低落,加之在遲鈍凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,淘汰了冰晶形成,從而制止細(xì)胞毀傷。尺度冷凍速率開始為-1 到 -2℃/min,當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加快,到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

現(xiàn)在常用的掩護(hù)劑為二甲亞砜(DMSO)和甘油,它們對(duì)細(xì)胞無毒性,分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞。

使用材料

儀器:液氮罐、凍存管(塑料螺口專用凍存管或安瓿瓶)、離心管、吸管、離心機(jī)等

試劑:0.25%胰酶、造就基、含掩護(hù)劑的造就基(即凍存液)

附:凍存液配制:造就基參加甘油或DSMO,使其終濃度達(dá)5-20%。掩護(hù)劑的種類和用量視差別細(xì)胞而差別。配好后4℃下生存。

操作步聚

1.消化細(xì)胞,將細(xì)胞懸液網(wǎng)絡(luò)至離心管中。

2.1000rpm離心10分鐘,棄上清液。

3.沉淀加含掩護(hù)液的造就,計(jì)數(shù),調(diào)解至5106/ml左右。

4.將懸液分至凍存管中,每管1ml。

5.將凍存管口封嚴(yán)。如用安瓿瓶則火焰封口,封口肯定要嚴(yán),不然蘇醒時(shí)易出現(xiàn)爆裂。

6.貼上標(biāo)簽,寫明細(xì)胞種類,凍存日期。凍存管外拴一金屬重物和一細(xì)繩。

7.按下列次序降溫:室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時(shí))→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。

注意:操縱時(shí)應(yīng)警惕,以免液氮凍傷。液氮定期查抄,隨時(shí)增補(bǔ),絕對(duì)不克不及揮發(fā)潔凈,一樣通常30立升的液氮能用1~1.5月。查特液氮罐
  • 本文鏈接地址:http://m.jg688.com/522.html
  • 收縮
    • 電話咨詢

    • 010-80204245
    • 微信咨詢
    暴虐sm调教a片| 青青草視頻國產av劇情超爽系列| 五个黑人玩一个女5P视频| 男人又粗又大又猛又硬| 把头埋入茂密的两腿之间| 厨房玩弄丝袜人妻系列国产电影| 色婷婷香蕉在线一区二区| 新chinese无套小帅ktv | 国产综合在线观看| 无码国产精品一区二区高潮| 麻豆av天堂一二三区视频| 小雪嗯快啊高潮了喷水了| 少妇放荡的呻吟干柴烈火| 欧美性受xxxx| 老婆出轨时接听老公电话| ass鲜嫩鲜嫩pics日本| 放荡亲女养成h| 日本亲与子乱人妻IHD| 免费男女囗交视频在线观看| 男女吃奶做爰猛烈紧视频| 封神榜之凤鸣岐山| 被多个强壮的黑人灌满浆| 少妇放荡的呻吟干柴烈火| 无码人妻熟妇av又粗又大| 色欲av蜜臀一区二区三区| 黑人bbcvideos极品| 前女友黑化日常| 校花醉酒后被乞丐进入| 波多野结衣作品| 男男惩罚羞耻双腿分打屁股小作文| 欧美激情第1页| 上流社会韩国电影| 公交车上内裤滑进去了会怎么样 | 总裁把她的乳尖都吸大了| 无码人妻丰满熟妇啪啪网站牛牛| 国产精品一区| 国产免费一区二区三区免费视频| 色哟哟免费精品网站入口| 久久亚洲av无码西西人体| 歪歪漫画网免费版在线观看| 女性私密部位粉嫩|